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viernes, 22 de noviembre de 2013

DISEÑO DE BIORREACTORES PARA FERMENTACIÓN EN MEDIO SÓLIDO

BIO-REACTORS DESING FOR SOLID STATE FERMENTATION

En años recientes ha existido un gran interés en los procesos de fermentación en medio sólido por los altos rendimientos que se han obtenido en la producción de metabolitos de alto valor agregado de interés industrial, por lo que se han llevado a cabo investigaciones en el diseño de biorreactores en busca de que sean aplicados a nivel industrial. En el presente trabajo se llevó a cabo una revisión de los principales equipos diseñados para los bioprocesos en cultivo sólido.

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EL USO DE BIORREACTORES DESECHABLES EN LA INDUSTRIA BIOFARMACÉUTICA Y SUS IMPLICACIONES EN LA INGENIERÍA

THE USE OF DISPOSABLE BIOREACTORS IN THE BIOPHARMACEUTICAL INDUSTRY AND ITS IMPLICATIONS ON ENGINEERING


En la industria biofarmacéutica actual, los requerimientos para el diseño de un biorreactor difieren sustancialmente de aquellos de hace 50 años. Hoy en día las nuevas estrategias de cultivo permiten obtener alta densidad celular con altos rendimientos de productos biotecnológicos que deben cumplir con elevados estándares de calidad y normatividad compleja en su producción. Lo anterior obliga el desarrollo de nuevas tecnologías para suplir estas   necesidades, por lo que en los últimos diez años el diseño y uso de biorreactores desechables ha crecido de manera exponencial. 

Los beneficios de la tecnología desechable son principalmente la eliminación de largos procesos de limpieza, esterilización, calificación, validación, reducción de tiempo entre lotes, el procesamiento de diferentes productos en la misma área, entre otros, lo que conlleva la disminución de los costos que implican esta serie de procedimientos.

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EFECTOS DE CORTE EN BIORREACTORES

Los esfuerzos de corte promedio de flujo laminar no son suficientes para causar daño a la mayoría de los microorganismos, pero los esfuerzos formados por el rompimiento turbulento del chorro laminar si lo son. Las velocidades de corte turbulento son difíciles de definir debido al ángulo variable entre los flujos de las dos posiciones.
Los efectos de corte sobre los microorganismos han sido los resultados que se resumen en la siguiente tabla.


Correlación para el corte
INVESTIGADORES
EQUIPO EXPERIMENTAL
VOL.(l)      IMPULSOR                              (mm)
ORGANISMO
INDICACIÓN DE DAÑO
CORRELACIÓN
Midler y Finn (1996)
  2.3             50
  7.5            100
                   125
Protozoarios (sistema modelo)
Rompimiento celular
Función compleja de NDi
No correlacionado por Re o PN

Tanaka et al. (1975a, b)
   5.0            64
  10.0           84
  10.0          100
Cultivos miceliales varios (por ej. M Javanicus)
Perdida de nucleótidos
Función lineal de NDi
No correlacionado por Re o PN
Taguchi et al. (1968)
   4.5            60
Gránulos de L. edodes y A. Niger
Fragmentación

Ruptura
dDp/dt=kc(NDi)5.5Dp5.7

dn/dt = ktnDp3.2 (NDi)5.7 (NDi)3
N= velocidad rotacional del agitador. Di =diámetro del agitador. Dp=diámetro del; PN= potencia por unidad de vol.;    Re=no. De Reynolds; n= no. De paquetes sobrevivientes; L = longitud hifal media; Kc, kr= constantes.


Estas correlaciones son razonablemente consistentes en relacionar el corte a una función de velocidad periférica del impulsor (ND) solamente, aunque la forma de la función varia en el sistema experimental. La única excepción es el trabajo de Taguchi et al. (1968) donde el daño también fue función del flujo volumétrico ND3; este parece ser el caso solamente donde hay fatiga en el suavisamiento del organismo.
Uno de los problemas principales de este trabajo fue que se llevó a cabo usando depósitos de pocos litros de capacidad y no hay datos relativos al aumento de escala. La experiencia industrial ha indicado que la dependencia de la velocidad periférica del impulsor no se mantiene en cambios a gran escala. Parte de la razón de esto puede ser que, a escala industrial los agitadores trabajan bajo condiciones turbulentas, en tanto que este puede no ser el caso a escala del laboratorio.


BIORREACTOR DE MEMBRANA



BIORREACTOR DE MEMBRANA 

El Biorreactor de Membranas es un sistema de tratamiento muy compacto por su gran eficiencia de hasta un 95 % y por la poca área que ocupa, ideal para sectores en donde el terreno tiene un precio considerable o en donde una planta de tratamiento e mayores dimensiones puede desvalorizar la propiedad. Este tratamiento combina un proceso de depuración biológica con 
una filtración por membrana, la membrana retiene prácticamente la totalidadde los sólidos en suspensión y la biomasa, logrando de esta manera un efluente de gran calidad.

BIOREACTORES CON MEMBRANA INTEGRADA O SUMERGIDA


La unidad de membrana que realiza la separación física está inmersa en el tanque biológico. La fuerza impulsora a través de la membrana es alcanzada presurizando el bioreactor o creando presión negativa en el lado permeado de la membrana. 
La limpieza de la membrana se realiza a través de frecuentes retrolavados con agua permeada y aire y ocasionalmente mediante retrolavados con soluciones químicas. Generalmente se coloca un difusor de aire justo debajo del módulo de la membrana para suministrar el aire necesario para homogeneizar el contenido del tanque, para el proceso biológico y para la propia limpieza de la membrana.


MEMBRANAS EXTERNAS O CON RECIRCULACIÓN AL BIOREACTOR

Esta configuración de MBR implica que el licor de mezcla es recirculado desde el bioreactor hasta la unidad de membrana que se dispone externamente a la unidad biológica. La fuerza impulsora es la presión creada por la alta velocidad del flujo a través de la superficie de la membrana.


TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES 
MEDIANTE UN BIORREACTOR DE MEMBRANA 

El tratamiento de aguas residuales especialmente urbanas aplicando la tecnología de Biorreactor de Membrana, comúnmente conocida por sus siglas en ingles como “MBR” (Membrane Biological Reactor); ha tenido un avance muy importante en Europa durante la última década principalmente por la necesidad de muchas instituciones de cumplir con las cada vez más estrictas normas europeas relacionadas con el tratamiento y vertido de aguas residuales. 






Fundamento de los biorreactores de membrana

Los Biorreactores de Membranas o Reactor Biológico de Membrana se puede definir como la combinación de dos procesos elementales que son: por un lado un proceso de degradación biológica que puede ser aerobia o anaerobia y un proceso de separación de sólidos y líquidos mediante una unidad de filtración por membrana en el cual los sólidos en suspensión y microorganismos responsables de la biodegradación son separados del agua 
tratada. 

Biorreactor con membrana externa

En este caso generalmente se coloca un difusor de aire justo debajo delmódulo de membranas para suministrar el oxigeno necesario para el proceso biológico, homogenizando el contenido del tanque yproporcionando 
una limpieza a la membrana. 

Biorreactor con membrana sumergida

Las membranas deben de limpiarse con periodicidad mediante retrolavado y en ocasiones mediante lavado químico o ambos. 


TECNOLOGIA DE MEMBRANAS 


Se puede definir membranas como barreras físicas semipermeables que separan dos fases del flujo de entrada, impidiendo su íntimo contacto y restringiendo el movimiento de las moléculas a través de ella de forma selectiva. Este proceso selectivo permite la separación de las sustancias contaminantes del agua, generando un efluente líquido depurado. 




TIPOS DE MATERIALES DE MEMBRANA 


Principalmente existen dos tipos de materiales que se suelen utilizar, estosson los poliméricos y cerámicos. Aunque también existen membranas de filtros metálicos estos no tienen ninguna relación con el sistema MBR. El material de la membrana debe ser formado (o configurado) de tal modo para permitir al agua pasar por ella. 
  • Polifluoruro de Vinilideno (PVDF) 
  •  Polietilsulfonas (PES) 
  •  Polietileno (PE) 
  •  Polipropileno (PP)

CONFIGURACION DE LAS MEMEMBRANAS 


La configuración de la membrana se refiere a su geometría y la manera 
en que esta es orientada en relación con el flujo de agua. El módulo de 
membranas define como se agrupan las membranas y permite conocer el 
comportamiento del fluido sobre la superficie de esta. 

 La membrana deberá ser configurada para tener: 

  • Un área grande de membrana. 
  •  Un alto grado de turbulencia para la promoción de transferencia de 
  • masas sobre el lado del afluente. 
  •  Un gasto de energía bajo por volumen de agua producido. 
  •  Un precio bajo por membrana en relación al área. 
  •  Un diseño que facilita la limpieza, 
  •  Un diseño que permite la modulación.


USO DE BIORREACTORES PARA CONTROLAR LA
CONTAMINACIÓN DEL AIRE

INTRODUCCIÓN
Los Biorreactores utilizan un proceso natural tan antiguo como la vida misma. Para poder Sobrevivir, cualquier ser viviente debe tener una fuente de energía (alimento) y agua (humedad).  La manera en que se usan estas necesidades para eliminar contaminantes de corrientes de aire contaminadas es el tema de este reporte.

¿Qué es la biorreacción?
En la contaminación del aire, la biorreacción simplemente es el uso de microbios para consumir contaminantes de una corriente de aire contaminado. Casi cualquier sustancia, con la ayuda de microbios, se descompondrá (desintegrará), dado el medio ambiente apropiado. Esto es especialmente cierto para los compuestos orgánicos. Sin embargo, ciertos microbios también pueden consumir compuestos inorgánicos, tales como el sulfuro de hidrógeno y los óxidos de nitrógeno.
¿Por qué es importante la biorreacción?
En pocas palabras: ¡SU COSTO! El costo de capital de una instalación por biorreacción es por lo general una mera fracción del costo de una instalación de un dispositivo de control
Tradicional. Los costos operativos también son generalmente considerablemente menores que  los costos de la tecnología tradicional. Las unidades de control térmico y catalítico consumen grandes volúmenes de combustible costoso. Los Biorreactores utilizan únicamente cantidades pequeñas de energía eléctrica para conducir dos o tres motores pequeños. Normalmente, los Biorreactores no requieren mano de obra a tiempo completo, y los únicos suministros operativos necesarios son pequeñas cantidades de macronutrientes. Los biofiltros, el tipo de biorreactor más común, por lo general emplean lechos (medios sobre los cuales viven los microbios) fabricados de materiales orgánicos que ocurren naturalmente (materiales cortados de parques y jardines, turba, corteza, astillas de madera o abono) que son consumidos lentamente por la biomasa (es decir, microbios). Estos lechos orgánicos por lo general pueden suministrar la mayoría de los macronutrientes necesarios para sustentar la biomasa. Los lechos se deben reemplazar cada 2 a 5 años, dependiendo de la opción de material del lecho.
La biorreacción es un proceso "verde," mientras que los enfoques tradicionales no lo son.
La combustión de cualquier combustible generará óxidos de nitrógeno (NOx), materia particulada, dióxido de azufre (SO2) y monóxido de carbono (CO). Los Biorreactores por lo general no generan estos contaminantes ni ningún contaminante peligroso Los productos de una biorreacción que consume hidrocarburos son agua y dióxido de carbono (CO2).

¿Cómo funcionan los Biorreactores?

Los biorreactores se han usado por centenares de años para tratar aguas cloacales y otros desechos olorosos transportados por el agua. Hace aproximadamente sesenta años, los europeos comenzaron a usar los biorreactores para tratar el aire contaminado (olores), en particular, las emisiones provenientes de las plantas de tratamiento de aguas cloacales y las plantas extractoras de grasa. El proceso inicial utiliza un dispositivo denominado "biofiltro."  Un biofiltro es por lo general una caja rectangular que contiene un pleno encerrado en al fondo, un bastidor de soporte arriba del pleno, y varios pies de medios (lecho) arriba del bastidor del soporte.

Se utiliza un ventilador para recoger el aire contaminado de un edificio o proceso. Si el aire es demasiado caliente, demasiado frío, demasiado seco o demasiado sucio (con sólidos suspendidos), podría ser necesario pre tratar la corriente de aire contaminada para obtener las condiciones óptimas antes de introducirla al biorreactor. El aire contaminado se transmite a un pleno por medio de un conducto. A medida que fluyen las emisiones a través de los medios del lecho, los contaminantes son absorbidos por la humedad en los medios del lecho, entrando en contacto con los microbios. Los microbios reducen las concentraciones de contaminante al consumir y metabolizar los contaminantes. Durante el proceso de digestión, las enzimas en los microbios convierten los compuestos en energía, CO2 y agua. El material no digerible queda como remanente y se convierte en residuo.


FACTORES QUE AFECTAN EL RENDIMIENTO:
VARIABLES Y LIMITACIONES

Dado que los biorreactores utilizan cultivos vivos, se ven afectados por muchas variables en su medio ambiente. A continuación se indican las variables y limitaciones que afectan el rendimiento de todos los biorreactores, independientemente del tipo de proceso.

Temperatura
Todas las variables discutidas aquí son importantes. Sin embargo, la variable más importante que afecta las operaciones de un biorreactor probablemente es la temperatura. Un chorro de aire caliente puede matar totalmente una biomasa con mayor rapidez que cualquier otro accidente. La mayoría de los microbios puede sobrevivir y florecer en un rango de temperaturas de 60 a 105°F (30 a 41°C) (Ref. 3). Es importante monitorear la temperatura del lecho por lo menos una vez al día, pero cada ocho horas sería incluso más seguro. Una alarma de alta temperatura en la entrada de las emisiones también es una buena precaución de seguridad. Cuando las emisiones provenientes de un proceso son demasiado calientes, los operadores con frecuencia hacen pasar las emisiones calientes a través de un humidificador que enfría los gases por medio del enfriamiento evaporativo. Éste es el método más económico disponible para enfriar las emisiones de 200 a 300°F (93 a 149°C) a temperaturas de menos de 105°F (41°C). Además del efecto de enfriamiento, este proceso también aumenta el contenido de humedad (humidifica la corriente de emisiones), un efecto colateral deseable.

Humedad
La segunda variable más crítica es la humedad del lecho. Los microbios necesitan humedad para sobrevivir y la humedad crea la biopelícula que elimina (absorbe) contaminantes de una corriente de aire, de modo que puedan ser asimilados por los microbios. Los problemas de baja humedad pueden corregirse al hacer pasar las emisiones a través de un humidificador. Al tener emisiones próximas a la saturación (100 % de humedad relativa) resolverán la mayoría de los problemas de lecho seco. No es necesario que los humidificadores sean elegantes recipientes de proceso de acero inoxidable, comprados en una tienda. Pueden construirse de un tanque viejo sobrante de plástico reforzado con fibra, o bien se puede construir de paneles de fibra de vidrio con una estructura de madera. El diseño debería incluir varias filas de tuberías cerca de la parte superior del recipiente, con cabezales aspersores instalados todo a lo largo, y válvulas de encendido/apagado en cada tramo de tubería para proporcionar algo de control de la humedad.
Los biofiltros por lo general se operan húmedos, sin agua corriente ni estancada. Una baja humedad, durante períodos breves, no matará a los microbios, pero sí reducirá en gran medida la eficiencia. La eficiencia será menos que la óptima mientras los microbios se recuperan (reaclimatan) después de un período de condiciones de lecho seco.

Cuidado y alimentación
El nitrógeno es un nutriente esencial para el crecimiento microbiano. Los microbios utilizan el nitrógeno para construir las paredes celulares (las cuales contienen aproximadamente el 15 por ciento de nitrógeno) y el nitrógeno es un constituyente principal de proteínas y ácidos nucleicos. Los microbios son capaces de utilizar todas las formas solubles de nitrógeno, pero no todo el nitrógeno está disponible para su reutilización. Algunos productos de nitrógeno provenientes de los procesos de digestión son gases (óxidos de nitrógeno y amoniaco), y pequeñas cantidades de éstos saldrán del proceso junto con las emisiones. No obstante ello, la mayor parte de los vapores que contienen nitrógeno se reabsorbe en el líquido y es consumido por los microbios. Además, algunos productos de nitrógeno forman compuestos solubles en agua, y se eliminan del sistema por lixiviación con agua condensante.
Otros macronutrientes esenciales incluyen el fósforo, potasio, azufre, magnesio, calcio, sodio y hierro. Puede agregarse nitrógeno, fósforo y potasio (el código NPK en las etiquetas de los fertilizantes) al incorporar fertilizantes de uso agrícola en los medios del lecho. Pueden adquirirse macronutrientes menos solubles, tales como el magnesio, calcio, sodio y hierro, en pequeñas cantidades en tiendas de venta de forraje y semillas. El contenido de nutrientes de un lecho.

Acidez
La mayoría de los biorreactores funciona mejor cuando el pH del lecho es cercano a 7, o neutro. Algunos contaminantes forman ácidos al descomponerse. Algunos ejemplos de estos compuestos son: sulfuro de hidrógeno, compuestos orgánicos de azufre, y halógenos (cloro, flúor, bromo y yodo). La producción de ácidos con el correr del tiempo disminuirá el pH y finalmente destruirá los microbios. Si un proceso emite contaminantes que producen ácidos, se deberá desarrollar un plan para neutralizar estos ácidos.


PROCESOS DEL BIORREACTOR

A partir del diseño básico del biofiltro, algunos procesos nuevos han evolucionado para convertirse en ambiental y comercialmente viables. Estos nuevos procesos se dirigen a situaciones que no se han afrontado de manera adecuada en el diseño básico de un biofiltro, tales como la gran cantidad de espacio requerido, los ambientes ácidos (control del pH), los 8 contaminantes que requieren tiempos de asimilación más prolongados y la alimentación de los nutrientes.


SISTEMAS DE CULTIVO Y ASPECTOS GENERALES DE BIORREACTORES

Como ya se dijo, el equipo donde se realiza el proceso se denomina biorreactor o fermentados.

El mismo provee todos los servicios que son necesarios para el cultivo, tales
como mezclado, termostatización, suministro de oxígeno, entradas para adición de nutrientes, control del pH, etc. Por otra parte, cuando se habla de sistemas de cultivo o, también, métodos de cultivo, se hace referencia al modo de operar el biorreactor, esto es en forma continua o discontinua.

la información completa de este tema esta en el siguiente enlace